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取材与标本固定
1. 取材 对于原位杂交所用的材料要尽可能新鲜,为了防止rna的降解,取材要迅速,取材后要尽快固定或冷冻保存。
2.固定 进行原位杂交的组织或细胞必须经过固定处理,固定的目的是为了保持细胞形态原有结构;保存细胞内的dna或rna的水平;使探针易于进入细胞或组织内。
3.固定液 常用固定液有10%甲醛、4%---、冰----酒精混合液、bouin氏固定液等。这些固定液都有不同的优缺点因此要根据具体的实验对象,选择的固定液。
4.固定方法 组织标本取材后,迅速放入固定液中2~4h,取材组织大小为1cm×1cm×0.5cm,不宜太大。---时,动物组织可进行灌流固定,然后将组织按要求取材放入20%蔗糖中,4℃过夜,次日可行冰冻切片。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的---公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原---白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、---、细胞等生物实验。
原位杂交第二天1.1将探针回收,放于-20c保存通常探针可重复使用十次左右。2加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。3置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。4置换0.2xssct1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。
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