原位杂交试剂电话,武汉思特进公司

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的-公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原-白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、-、细胞等生物实验。同其他的生物技术一样，原位杂交技术在其发展与应用的过程中会出现一些问题，但随着原位杂交技术的不断改进与完善以及检测手段的改进，原位杂交技术的-性越来越-，其应用也会广泛。

原位杂交技术因其高度的灵敏性和准确性而日益受到许多科研-的欢迎，并广泛应用到基因定位、和基因图谱的构建等研究领域。近研究结果表明，寡核苷酸探针16-30nt能自由出入-和组织细胞壁，杂交效率明显高于长探针，因此，寡核苷酸探针和不对称pcr标记的小dna探针或体外转录标记的rna探针是组织原位杂交优选探针。目前原位杂交技术在植物中的应用比较广泛，例如在棉花、麦类和树木等的遗传育种方面取得了-的成就，在畜牧上原位杂交技术主要用于基因定位和基因图谱的构建以及-的检测和等方面。

组织切片与预处理

冰冻切片：新鲜组织也可在取材后，直接置入液氮中迅速骤冷，冷冻切片后，4％-固定5～10min，也可保存在-70℃中待用。杂交前切片迅速恢复至室温并干燥，0.1mol pbs洗三次，2×ssc洗10min，滴加预杂交液室温孵育1h。

杂交与显色

杂交将已标记的探针加入预杂交液即成为杂交液探针浓度为1μg/m1，切片经2×ssc短暂浸洗后，滴加杂交液，于湿盒内置37℃或42℃孵育过夜。此外，原位杂交还是显示细胞亚群分布和动向及病原微生物存在方式和部位的一种重要技术。然后依次经2×ssc室温浸洗1h，l×ssc室温浸洗lh，0.5×ssc 37℃浸洗30min，0.5×ssc室温浸洗30min。注意滴加杂交液时切片勿干燥。

显色以下各步均在室温下进行。

1缓冲液i洗1min。

2用含2%正常羊和0.3％tritonx-100的缓冲液i孵育切片30min。

3用含1％正常羊和0.3％tronx-100的缓冲液i稀释羊抗dig。

4将稀释液滴加在切片上，封口膜覆盖，湿盒内4℃孵育过夜。

5缓冲液i洗10min。

6缓冲液ⅱ洗10min。

7加显色液，封口膜覆盖，避光室温孵育2～20h，随时镜检，当显色满意时入缓冲液ⅲ终止显色。

显色液临用前配，其配方为：nbt 45μl；x-phospllate液 35μl；左旋咪唑      2.4mg；缓冲液ⅱ 加至10ml。

8常规脱水、透明、封固。

结果：杂交阳性信号为紫蓝色颗粒。