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武汉思特进科技发展有限公司
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原位杂-及的步骤:玻片的准备和样品固定,细胞或组织的预渗透处理,靶dna变性dna原位杂交,探针制备,原位杂交过程,杂交后洗涤,探针显色检测。
玻片的准备和样品固定
对于染色体涂片,1:1的-/醚处理的载玻片已能符合要求。对于组织切片的原位杂交,为了在实验过程中不丢失组织样品,可使用多聚赖氨酸或铬矾明胶包被的载玻片。
样品的固定步骤是为了保持样品的原有形态学。样品固定是原位杂交中的步骤,从化学反应角度来看,固定剂的使用和选择对后续杂交的影响不会太大,因为-杂交的功能分子基团被-包裹在dna双螺旋结构中,而交联剂的使用对rna基本没有影响。对于染色体涂片,常使用/固定;石蜡包埋的组织切片用固定。冷冻切片可通过在4%的-中固定30min,或使用bouin固定剂。
1、致模因素对动物模型的影响
应明确研究目的,清楚相应人类-的发生、--和发病机制,熟悉致病因素对动物所产生的--和发病情况,致病因素的剂量。
2、动物因素对动物模型的影响
品种、品系、年龄体重、性别、生理状态等
3、实验技术因素对动物模型的影响
实验季节、昼夜过程、-、手术技巧、实验给药、对照组的影响等。
4、环境因素和营养因素对动物模型的影响
模型的成败往往与环境的改变有密切关系。拥挤、饮食改变、过度光照、噪音、屏障系统的破坏等,任何一项被忽视都可能给模型动物带来-影响。