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武汉思特进科技发展有限公司
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原位杂交试验
收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%-固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲6醇2%-溶液洗,然后换成甲9醇,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧6水处理,去除色素。或者使用-锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)
就dna探针和rna探针的比较,dna探针在杂交过程中会出现探针双链之间退火的可能,也更倾向于在溶液中形成大分子的探针聚合体,从而影响其渗透能力。而rna 探针的应用,将提高dna-rna杂交子的热稳定性。
tips:rna探针因其单链、高分子结合力、可适应高温杂交的特性,其检测特-和灵敏度均优于dna探针。常用的rna探针标记方法为构建质粒后进行转率合成。通过pcr扩增的方法,可以更方便地进行rna探针的制备;rna探针合成后,还需验证其对目标片段检测的灵敏度和特-。